插入序列选择 焦点热议

(资料图片仅供参考)

1、 插入序列选择insertion seyuc}ncc aele}tinn一种从普通的细胞群中仄别和选择经基因操作插人f外7}基因的细胞的方法:如果没有抗生素耐药性的标记物可用，而插入的序列包含有一个生物合成途径的酶的密码，则可用遗传选择的方法、用载体来感染突变体细胞，这些细胞不能生长或产生一个可供辨认的代谢物(如一种色素):加入的基因补足了突变宿主的缺陷，而只有已转型约细胞才能牛长或产生特殊的代谢物。

2、这样，这些细胞就能被分离井大量生长免疫化学法也可用于检测出能够合成外源蛋白质的克隆，备一个影印培养平皿，然后细胞被溶解并从阳性菌落中释放出杭原。

3、再把一片载有抗休的聚乙烯膜放在平皿表面井与之接触、抗原抗体复合物的位置，也就是原始平皿上转型菌落的位置，如把平皿与作了同位素标记(如‘zsI}的[以G反应之后，即日f用放射自显影术检测了。

4、把影印培养平皿转印到硝化纤维滤纸或尼龙膜上，细胞也可被鉴别。

5、在用碱和蛋白酶处理后，细胞被除去，但变性的I}NA遗留并附着在滤纸(膜)上二进行gory烘干Lei定或紫外固定后，再和有放射性的核酸探针杂交的位置即可利用放射自显影术检测。

6、。

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